Tracking-adeno-assoziierten virus-capsid-evolution
Forscher verwendeten Hochdurchsatz-screening von adeno-assoziierten viralen (AAV) – Vektor-capsid-Bibliotheken, die zur Maximierung der Wahrscheinlichkeit der Erlangung von AAV-Varianten mit den gewünschten Eigenschaften. Als Ergebnis dieser Experimente, Sie gewann einige unerwartete Einblicke, berichtet in einem Artikel, veröffentlicht in der Menschlichen Gen-Therapie.
Mark Kay und Kollegen von der Stanford University (Stanford, CA) Co-Autor den Artikel mit dem Titel „Tracking-Adeno-Assoziierten Virus-Capsid-Entwicklung von Bein-Durchsatz-Sequenzierung.“ Die Forscher verwendeten Hochdurchsatz-screening von barcoded AAV-capsid-Bibliotheken zu verfolgen gerichteten AAV-capsid-evolution. Das ultimative Ziel ist eher in der Lage sein, schnell zu identifizieren eine verbesserte rekombinante AAV-Vektoren für den Einsatz in klinischen Gentherapie-Studien.
Zu den wichtigsten Erkenntnissen war der folgende: es ist nicht unbedingt notwendig, mehrere Runden der Selektion, und das kann in der Tat kontraproduktiv. Funktionale und effiziente AAV-Varianten erhalten wurden, nach nur einer Runde der Selektion. Darüber hinaus die Infektion mit einer hohen multiplizität der Infektion (MOI) ist vorzuziehen, um eine Infektion mit einer niedrigen MOI, wie die Verwendung niedriger MOIs führt zu mehr variation zwischen den Bildschirmen und ist nicht optimal auf die Auswahl der am meisten gewünschten capsids. Darüber hinaus kann Wettbewerb stattfinden zwischen AAVs mit bestimmten capsids, dass in den Zellen. Infiziert worden mit verschiedenen AAVs. Weitere wichtige Ergebnisse sind beschrieben in dem Artikel.